血小板因子₄的研究进展

医学信息1999年3月第12卷第3期

朱柏贵¹ 综述 杨 岚² 审校

1江苏省武警医院内1科（225001）²第四军医大学西京医院血液科（710032）

　　血小板因子4（PF₄），近几年已越来越受到人们的重视，是一种新近发现的造血细胞保护性抑制剂。通过先可逆性抑制骨髓造血细胞（尤其是巨核系），继而达到在化疗、放疗过程中保护造血细胞的目的。现综述如下：

　　1 PF₄简介

　　早在1984年Conley发现血小板减少的患者对肝素的敏感性增高^[1]，认为可能是血小板释放某种蛋白，中和了肝素的抗凝性。此后被其它学者陆续证实^[2]并称此蛋白为PF₄。PF₄是巨核细胞（MK）合成的，存在于MK和血小板α颗粒中的特异性稳定蛋白，含有70个氨基酸，由4个单体组成，每个单体分子量为7.8KD^[3]。PF₄属人趋化因子超家族，C-X-C亚族^[4]，定位于人4号染色体长臂，其cDNA含有一个开放阅读框架，羧基端含有肝素结合位点。生物活性包括：中和肝素^[5]；刺激白细胞弹性蛋白酶^[6]；趋化中性粒细胞、单核细胞和成纤维细胞^[7]；拟制内皮细胞的增殖、游走和血管的生成^[8，9]。

　　2 PF₄对造血细胞的影响

　　PF₄早期一直被认为在凝血、炎症和组织修复过程中发挥生理作用^[10-11]。直到80年代初期人们才发现正常人MK集落形成较血小板减少者差。1989年Geirtz在体外实验中^[12]，将PF₄及其多肽P_47-70与P_58-70加入到骨髓单个核细胞的培养基中，发现PF₄及P_47-70对MK有抑制作用，而对红系和粒系集落无抑制作用，P_58-70则无此反应。在正常情况下，凝血因子V（FV）仅在成熟的MK有表达。用生物素酰基化cDNA探针原位杂交技术探测FV的mRNA表达，当P_47-70与MK共同孵育时，MK中的FV的mRNA表达减少60%。此后不断有人报道，PF₄对MK及MK祖细胞的抑制作用，此抑制作用呈浓度依赖性，而且在高浓度时可抑制粒一单系集落形成单位（CFU-GM）、红系爆式集落形成单位（BFU-E）。

　　1996年Xi等报道^[13]：PF₄使源于脐血CD^+₃₄细胞的MK的集落形成明显减少，并与PF₄有剂量依赖关系。当这些脐血细胞与PF₄预孵2h，洗涤后放入另一培养基，MK集落的形成的有明显提高，3d开始上升，7d达到高峰，12d开始下降但仍对照组明显增高。这些未洗涤的预孵育细胞，经5-氟尿嘧啶（5-FU）处理后，MK集落也显著升高。Aidoudi s在小鼠体内实验中^[14]，注射PF₄20h后，再注射5-FU，1周后，高增殖潜能集落细胞、BFU-E、CFU-GM、CFU-MK，MK与单纯注射5-FU对照相比，均有显著升高，白细胞、血小板8～10d开始上升，24～25d恢复正常，血红蛋白则无变化。PF₄能维持正常骨髓单个核细胞和脐血CD^+₃₄细胞的生长，并能保护其不被细胞毒药物诱导凋亡，显著降低对化学药物的敏感性，使一些细胞毒药物50%的抑制浓度（CI₅₀）升高。最近研究表明^[16]：PF₄多肽P_34-58较PF₄有更强的造血抑制活性，对CFU-MK、BFU-E、CFU-GM的抑制是相同的，不象PF₄对CFU-MK的作用明显，且抑制作用大于PF₄的60倍。

　　3 PF₄对骨髓作用的机制

　　PF₄有些作用机制还十分清楚，其受体至今尚未明了。据Lecomte-Raclet l 报导：^[16]PF₄中央区域P_34-58是一个完整的功能区，主要含有DLQ（天门冬氨基酸、亮氨酸、谷氨酰胺）序列，固定在54～64位，当DLQ缺失时抑制活性完全消失，且对肝素缺乏亲合性，抑制作用也不被肝素中和。肝素和几种其它氨基葡聚糖在体内外能刺激MK生成^[17-18]，用肝素激酶和软骨素处理细胞或通过抑制糖蛋白合成，可抑制MK生长。同样浓度的氨基葡聚糖不能刺激存在有GM-CSF或IL-3的粒系生长。此可支持PF₄对CFU-MK的作用明显。同时PF₄通过C端尾部阳离子与细胞表面的氨基葡聚糖，阻止细胞与一些生长因子相互作用，导致细胞增殖的抑制以及引起PF₄自身分子的改变，使得中央部分的功能区易与细胞接触，最后诱导增殖抑制。人为的切除PF₄的C端与N端与可导致中央功能区完全暴露，产生造血抑制作用。PF₄还可阻止造血细胞进入S期，对已进入S期的细胞能抑制DNA的合成^[19-20]，被其处理的细胞仍然成活但处在相对静止状态。这些可说明，PF₄能减少细胞对化学毒剂的敏感性，通过减少细胞毒剂对造血细胞的抑制，而达到保护造血细胞免疫损伤的目的。目前的研究表明了化疗药物对肿瘤细胞的作用是诱导其凋亡。PF₄与正常造血细胞孵化后，再用化疗药物的处理，不仅细胞未受损伤，反而使造血细胞集落显著上升。但是，当PF₄与人红白血病细胞株HEL、早幼粒细胞白血病细胞株HL-60共同孵育后，并不能使其集落数上升，这些可进一步说明，PF₄仅对正常造血细胞起保护作用。

参考文献

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编辑 任鸿兰

校对时间：99-12-723:11 何娟迎