抗炎明目汤治疗慢性葡萄膜炎的临床及实验研究

　　中国中医眼科杂志1999年第9卷第3期

郭霞吕璐刘玲

　　摘　要 目的：观察抗炎明目汤治疗慢性葡萄膜炎的效果及其对免疫功能的调节作用。方法：95例（140只眼）患者接受了抗炎明目汤的治疗。治疗期间有的患者局部应用了皮质类固醇。其中对30例患者在治疗前后测定了体内IgA、IgG、IgM、循环免疫复合物、玫瑰花结形成试验和淋巴细胞转化试验。对小鼠在灌服抗炎明目汤治疗前后的T淋巴细胞亚群及T淋巴细胞转化试验进行了检测。结果：95例（140只眼）中116只眼(82.8%)治愈；24只眼（17.2%）视力提高4行以上。与治疗前相比，患者的细胞免疫和体液免疫功能均有明显改善（P＜0.01）。结论：抗炎明目汤对慢性葡萄膜炎有治疗作用，并可双向调节免疫功能。

　　关键词：慢性葡萄膜炎 抗炎明目汤 细胞免疫 体液免疫

　　慢性葡萄膜炎是一种常见的可严重损害视功能的眼病。病因复杂，常反复发作，易产生并发性白内障及继发性青光眼而致失明。本病的治疗甚为棘手。我们自1992年8月至1998年8月用抗炎明目汤^〔1〕为主治疗慢性葡萄膜炎取得一定疗效，并经动物实验观察了作用机理，总结如下。

　　1 临床研究

　　1.1 临床资料和方法

　　诊断标准参照《眼科全书》制定。病例选择患慢性葡萄膜炎病程1个月以上或经常反复发作者，共95例140只眼，其中葡萄膜大脑炎30例60只眼均为门诊患者。男58例，女37例；年龄最小18岁，最大70岁，平均37.9岁±13.2岁。病程最短1个月，最长36个月，平均15月±7月。治疗时间最短28天，最长180天，平均52.3天±16.1天。

　　治疗方法：中药以抗炎明目汤治疗为主。方剂组成：黄芪30g生地15g 女贞子15g 黄精12g 太子参15g 知母15g 黄柏12g 当归12g云苓12g 淫羊藿15g 甘草10g。水煎服，每日1剂，早晚各1次，10天为1疗程，一般服药1～3个疗程。患者病情好转稳定后，为巩固疗效，防止复发，将上方增加9倍量，制成蜜丸，每丸重9g，每日2次，每次2丸，1个月为1疗程，一般用药1～2个疗程，停药定期观察。

　　眼前部若有明显炎症，给予0.5%可的松眼液及1%阿托品眼膏点眼。眼后部炎症较重者给强的松龙0.5 mg球后注射，7～10天1次，1～3次即可。

　　1.2 结果

　　疗效标准：治愈：视力恢复至发病前或达1.0以上，炎症全部消退。显效：视力提高4行以上，玻璃体轻微混浊，眼底视盘边界欠清，视网膜静脉稍充盈，黄斑区中心反射欠清。好转：视力提高2行以上，炎症减轻。无效：视力及炎症治疗前后无变化。

　　治疗结果：95例140只眼中治愈116只眼，占82.8%；显效24只眼，占17.2%，总有效率100%。服药期间未发现不良反应，无青光眼等并发症。治疗前后视力改变见表1。

表1 治疗前后140只眼视力的变化

　　 　随访结果：对80例患者进行了1～6年随访，其中复发12例，占15%。

　　免疫学检查：治疗前对52例患者进行了免疫学检查，体液免疫用琼脂扩散法检查免疫球蛋白 igG、IgA、IgM；用快速比浊法测定循环免疫复合物(CIC)，见表2。细胞免疫用T细胞提取法查玫瑰花瓣形成率试验检测活性玫瑰花(Ea)，稳定性玫瑰花(Es)，总玫瑰花(Et)。用植物血凝素激活淋巴细胞，检测淋巴细胞转化率，见表3。

表2 52例患者体液免疫检测结果

表3 52例患者细胞免疫 检测结果

　　 　30例患者治疗前后免疫学改变见表4。除IgA外，其他各项治疗前后对比，差异均有非常显著性(P＜0.01或0.001)。

表4 30例患者治疗前后免疫学检查改变 (x±s)

　　2 实验研究

　　2.1 实验材料与分组

　　实验动物为昆明种小白鼠，每只重18～20 g，随机分组。中药抗炎明目汤常规水煎剂，浓度为1 ml含生药2g。

　　仪器与试剂：①抗L₃T₄和LyT_-2McAb,FITC免抗大鼠IgG，临用前抗L₃T₄和抗LyT_-2加2 ml NS溶解，再以pH 7.4 PBS稀释至1∶100。FITC用PBS稀释至1∶10。②环磷酰胺(CY)200mg/瓶，用生理盐水稀释至15 mg/ml，硫唑嘌呤(AZP)用0.01 mNaHCO₃稀释 至7.5 mg/ml。③刀豆素A(ConA)250 mg/瓶(北京生物制品厂)用1640配制成100μg/ml，腺核苷酸(〔³H〕Tdr，中国原子能研究所)1 mci/ml。RPML1640培养液(美国产)内含10%小牛血清。青链霉素各200u/ml。闪烁液、闪烁仪(西安产)、CO₂培养箱(日本产)、荧光显微镜(美国产)，多头细胞收集器等。

　　实验分组：小鼠分5组：①正常组；②环磷酰胺(CY)组；③CY+中药组；④硫唑嘌呤(AZP)组；⑤AZP+中药组。每组10只。每只小鼠用中药液灌胃，每天0.5 ml，连续7天。正常组用等 量自来水灌胃，CY组、CY+中药组用中药液的第1天及第3天，每只小鼠腹腔注射CY3 mg(0.2 ml)，各1次。AZP组、AZP+中药组于用药的第1天及第3天每只小鼠腹腔注射AZP1.5 mg(0.2 ml)，各1次。

　　2.2 实验方法及结果

　　2.2.1 T淋巴细胞亚群检测

　　用McAb间接免疫荧光法，取用药7天的小鼠断头后取胸腺分离胸腺细胞。以Tris-NH₄Cl溶血，洗涤，最后制成细胞悬液，调细胞浓度至2×10⁶/ml，分4管(2×10⁶/管)，每管约0.2ml。2管加抗辅助性T细胞单克隆抗体(L₃T₄McAb)，100μl/管，另2管加抑制性T细 胞单克隆抗体(L_yT_-2McAb)100μl/管，置冰箱30min，用Hanu′s液洗涤2次，弃上清液剩约0.2ml，各加FITC标记的免抗鼠IgG结合物100μl，置冰箱30min，取出洗涤2次，弃上清剩约0.1ml，每管压片2张，于荧光显微镜下观察，计算荧光阳性细胞百分率及L₃T₄/L_YT_-2比值，结果见表5。

表5 抗炎明目汤对CY抑制小鼠，AZP超常小鼠胸腺细胞下淋巴细胞T淋巴细胞亚群的影响(x±s)

　　 　服用中药后CY抑制小鼠的L₃T₄细胞百分率及L₃T₄/L_YT_-2比值较服中药前显著性提高，P＜0.01。服用中药后AZP超常小鼠的L₃T₄细胞百分率及L3T₄/L_yT_-2比值较服中药前显著性降低，P＜0.01。2.2.2 t淋巴细胞转化

　　处死用药7天的小鼠，无菌取脾制成单细胞悬液以Tris-NH₄Cl溶血，洗涤后调整细胞浓度为5×10⁶/ml，在96孔培养板中加入细胞悬液0.2 ml(1×10⁶/孔)，并加ConA5μg/m l，对照组不加任何诱导剂，置37℃ 5% CO₂培养箱培养72h，于终止培养前18h每孔加入1μci/ml〔³H〕Tdr培养液，最后用多头细胞收集器收集在49型玻璃纤维滤纸上，烘干后按常规在液体闪烁计数器上测定Cpm(脉冲数)，结果用复管Cpm均值表示，见表6。

表6 抗炎明目汤对CY抑制 小鼠，AZP超常小鼠脾细胞T淋巴细胞转化功能的影响(x±s)

　　 　CY抑制小鼠服中药后较服中药前的Cpm结果显著提高(P＜0.01)。A zP超常小鼠服中药后较服中药前的Cpm结果有显著降低(P＜0.01)。此两组与正常组比较差异无显著性(P＞0.05)。实验显示抗炎明目汤有双向调节免疫功能的作用。

　　3 讨论

　　内因性葡萄膜炎是眼科常见病，可分为急性与慢性炎症。近年来，临床报道以治疗急性葡萄膜炎为多，或将急性与慢性放在一起讨论，这样不利于对慢性葡萄膜炎的研究和治疗方法的推广，疗效亦不易统计。治疗上急性葡萄膜炎的效果要好于慢性葡萄膜炎，由于慢性葡萄膜炎病程长，反复发作，易产生并发症等因素，决定了治疗上有一定难度。我们多年来接诊的葡萄膜炎患者中，有很大一部分是慢性葡萄膜炎，经过西医治疗或治疗不系统，长期反复不愈,这些患者的临床表献多为正气虚的症状和体征，如眼部炎症时轻时重，眼内干涩不适，视物昏。可伴有心烦失眠，五心烦热，口干咽燥，舌红、少苔，脉细数，或体弱乏力，易感冒，舌淡、苔白，脉弱等等。因此立足于慢性葡萄膜炎是一虚证，或本虚标实，正气虚邪不盛，认为该病应以扶正为主，扶正以祛邪。

　　慢性葡萄膜炎属中医“瞳神紧小”、“瞳神干缺”、“视瞻昏渺”、“云雾移睛”的范畴，在脏责之于肝肾。病势较缓，正虚邪不盛，正邪相搏，互有进退。病程缠绵，反复发作，症状时轻时重。本病由于久病伤阴，或劳伤过度等导致肝肾阴虚，肾水不足，阴虚火旺。抗炎明目汤是我院蔡华松根据临床实践针对慢性葡萄膜炎本虚标实、肝肾阴虚、虚火上炎的病机制定的扶正祛邪兼顾的方剂。方中黄芪、生地健脾益气，补肾滋阴，扶正以固本为君药；女贞子、黄精滋养肝肾；太子参、当归、茯苓健脾养血益气为臣药；知母、黄柏滋阴清热，收治虚火；淫羊藿补肾壮阳与甘草共为佐使。如此配伍补虚而不敛邪，泻火而不伤正，扶正与祛邪兼顾，共奏扶正固本，滋补肝肾，滋阴降火之功。临床上可根据患者气阴两虚的轻重，适当调整药味与用量。

　　经用本方治疗95例140只眼，痊愈116只眼，痊愈率82.8%，显效24只眼，显效率17.2%，总有效率100%，明显高于文献报道^〔2～4〕。6年随访的80例中，复发者占15%。文献^〔4〕报告38例，随访2年3个月，有10例2年无复发。文献^〔2〕报告，随访3～7年，复发率50%(3/6)。文献^〔5〕报告，随访2年，复发率占16.7%(5/30)。本组复发病例的症状均较轻，经咀部点眼及服用抗炎明目汤1～2个疗程即愈。

　　内因性葡萄膜炎病因较复杂，现认为是一种自身免疫性疾病。有认为本病患者在免疫应答过程中，各种免疫活性细胞间的相互协调作用发生紊乱，致使机体免疫功能异常，这可能是葡萄膜炎发病的原因之一。因此调节葡萄膜炎患者的免疫功能是控制炎症、防止复发的关键 ^〔6〕。葡萄膜炎患者的免疫功能紊乱，多趋向于体液免疫功能升高，细胞免疫功能降低^〔7〕。从表2及表3可以看出，IgG、IgM、CIC值高于正常者分别占检测总数的48.1%、38.5%、80.8%。细胞免疫中Ea、Es、Et、淋转值低于正常者分别占检测总数的51.9%、32.7%、38.5%、59.6%。抗炎明目汤中黄芪、女贞子、太子参、黄精，淫羊藿、当归等有增强细胞免疫功能的作用，如提高T细胞比值、提高淋转率、增强吞噬细胞功能、升高白F细胞等。黄柏、知母有抑制体液免疫作用，如促进吞噬细胞吞噬抗原、抑制抗体的产生^〔8〕。所以抗炎明目汤既扶正，又祛邪，既激发偏低的细胞免疫，又抑制过高的体液免疫，从而起到邪去正复，阴阳调和，免疫平衡的作用。这一作用从表4可以看出，治疗前后IgG、IgM、C iC、Ea、Es、Et、淋转率，差异有非常显著性，P＜0.01。另外，方中黄芪、生地、知母、甘草及淫羊藿有激素样作用，而无激素类副作用。

　　抗炎明目汤的动物免疫实验研究说明，免疫功能低下小鼠模型L₃T₄细胞及T淋巴细胞功能均低于正常组，服中药后两者均增加。而免疫增高的小鼠模型则反之，差异有非常显著性，P＜0.01(表5、表6)。动物实验显示本方可调节机体免疫功能，从而达到治疗目的。这与扶正固本，滋补肝肾，滋阴降火的治则是吻合的。本方标本兼顾，可提高疗效，减少复发及并发症，长期服用无副作用。

　　作者单位：郭霞吕璐：山东中医药大学附属医院眼科(济南250011)

　　刘玲：山东中医药大学眼科教研室

　　参考文献

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　　7　李凤鸣，主编.眼科全书(上).北京：人民卫生出版社，1996.5638刘正才，尤焕文，编著.中医免疫.重庆：重庆出版社，1983.46～58，63～69