TT病毒的研究现状及展望

庄辉

　　关键词：非甲～非庚型肝炎 tT病毒（TTV）

　　自1989年克隆成功丙型和戊型肝炎病毒，并建立了相应的实验室诊断方法后，病毒性肝炎被分为甲、乙、丙、丁和戊型。但仍有10%～20%急性病毒性肝炎病例不能分型，因而，将此类肝炎统称为非甲～非戊型肝炎。

　　1995年Simons等^［1］和Kim等分别用代表性差异分析法,从西非和美国非甲～非戊型肝炎病人血清中获得庚型肝炎病毒(HGV)克隆^［2］。初期的研究认为，HGV是非甲～非戊型肝炎的病原；但后来发现，在非甲～非戊型肝炎中，仅10%病例与HGV有关，其余90%病人与HGV无关；且多数研究表明，HGV可能不致病。因此，各国学者在继续探讨HGV致病性的同时，大力开展对新型肝炎病毒的研究。

　　1997年，Nishizawa等^［3］应用代表性差异分析法，从1例非甲～非庚型输血后肝炎病人血清中获得一个病毒克隆，经与基因库中已知的DNA序列比较，未发现有与其相同或相似的序列，提示为一种新型病毒。由于该克隆来源于1例姓名为TT的输血后肝炎病人，因此认为该病毒与肝炎有关，并命名为TT病毒（TTV），恰巧与输血传播病毒(transfusion transmitted virus)三个英文名词的字头一致，因而，在初期TTV被认为是输血后非甲～非庚型肝炎的病原。

　　最初Okamoto等报道，TTV为3.7 kb的无包膜单股DNA病毒，可能属于微小病毒科(Parvoviridae)^［4］。但最近报道，TTV的基因组全长为3852 bp, 较Okamoto报告的长113 bp,其基因结构类似环状病毒中的鸡贫血病毒，建议归为环状病毒科(Circoviridae)^［5］。关于TTV的基因分型，各家报道不一。其主要原因是目前尚无统一的分型方法，且均非对TTV全基因序列进行比较。

　　TTV感染分布广泛。据各国对不同人群TTV感染的流行病学调查，一般人群的TTV dNA阳性率多在10 % 以上。TTV主要经血液传播，暴露血液的人群(如职业供血员、静脉药瘾者、血液透析和输血病人等)TTV dNA 阳性率明显高于一般人群。马为民等^［6］报道，静脉毒瘾者的TTV dNA阳性率为41.8%,非甲～庚型肝炎病人为48％^［7］。但TTV也可经胃肠道途径(如粪－口途径)传播^［8-10］。从TTV感染者的血液、胆汁和粪便中均可检出TTV dNA，且肝组织和胆汁中TTV DNA滴度较血清中高10～100倍，提示TTV可能是在肝细胞中复制，然后分泌到胆汁，再由胆汁排至肠道，最后随粪便排出体外。TTV的性传播可能不起重要作用。

　　目前，TTV感染的实验室诊断主要用聚合酶链反应法(PCR)。抗-TTV抗体酶联免疫法(EIA)尚未建立。抗-TTV igG免疫沉淀法虽有报道，但操作较复杂，不适用于大规模筛查。

　　关于TTV致病性问题，最初认为TTV是输血后非甲～非庚型肝炎病原，但最近多数研究认为，TTV可能不致病：（1）国外几十次对比研究表明，在不同人群和各类肝病患者中，TTV感染率均较高，各组无显著差异,提示TTV与肝病的相关性不大；（2）多数TTV阳性病例无明显的肝病生化和组织病理学改变；（3）在一般人群中TTV感染率较高，但缺乏明显的肝脏损伤的证据；（4）用只含TTV的病人血清感染2只黑猩猩，虽分别于感染后93天和149天血清中检测到TTV dNA，但2只黑猩猩均无急性肝炎的生化和组织病理学改变，表明TTV对黑猩猩不致病，可能也不引起人类肝炎。但也有关于TTV致病的报道，尤其是我国的一些报道^{［10，11］}。

　　由于TTV的致病性问题尚未解决，因此，对TTV感染者是否需要治疗，意见不一。个别研究报道，干扰素治疗TTV感染无效。但也有相反的报道。

　　目前在TTV研究中迫切需要解决的问题是：（1）TTV的致病性；（2）实验室诊断技术；（3）流行病学调查及预防；（4）病毒的分子生物学特性。

　　据报道，多数非甲～非庚型肝炎病人无TTV标志；受血者可发生非甲～非庚型肝炎，且TTV DNA也为阴性；相当比例的慢性肝炎和暴发性肝炎病人无已知的肝炎病毒及HGV和TTV标志。因此，目前在继续开展对TTV研究的同时，应加强对其他新型肝炎病毒的研究。

　　在进行新型肝炎病毒(包括HGV和TTV)研究时，应注意以下几点：

　　1.应选择所有已知肝炎病毒的血清学标志均阴性的肝炎病例作为研究对象。除用EIA法检测各型肝炎的血清学标志外，还应用PCR法排除已知肝炎病毒感染，否则，即使从病人的血清或其他标本中发现新型病毒，也难确证肝炎是由该新型病毒所引起。

　　2.应用横断面现况研究以确定新型病毒与肝炎相关时，应设对照组，且对照组必须与病例组可比。例如肝癌组TTV感染率较对照组高，可能是由于肝癌组病人暴露血液(如注射、输血、医疗针刺及创伤等)的机会多于对照组，因而易感染TTV，而不是TTV感染导致肝癌的发生。此外，还应注意：横断面现况研究结果只代表调查时的状况，并不能确定感染的确切日期，可能TTV感染发生在肝癌前，也可能发生在肝癌后。欲证明新型病毒与肝炎有关，应注意病因与疾病的时间顺序，即病因在前，发病在后。

　　3.应加强随访研究。随访研究是了解病因与发病时间顺序的可靠方法之一。如随访检测某肝炎病人血清ALT和TTV dNA动态变化，发现其ALT高峰早于TTV DNA，则表示ALT升高并非由TTV病毒所致。如ALT高峰早于TTV dNA高峰，则不能认为ALT升高是由TTV引起的。

　　4.应用动物实验感染以确定新型病毒的致病性时，应注意：(1)于实验感染后，应连续观察动物血液中病毒由低滴度向高滴度上升的动态变化情况，以确定该病毒确实是在动物体内进行了复制，而不是实验注入的尚未被机体完全清除的残存病毒；(2)由于有些实验动物在感染前，因其他原因可能有肝功能和肝组织病理学异常，因此，欲证实新型病毒对动物的致病性，必须观察动物感染前后的肝功能及肝组织病理学动态变化情况；(3)应用动物免疫血清(包括单克隆抗体等)检测各种组织标本时，易出现假阳性。因此，必须用多种方法加以确证，以排除假阳性；(4)人和动物属于不同种属，某一病原对动物致病，不一定对人也致病；反之，对动物不致病，对人可能致病。因此，对动物实验感染结果下致病性结论时应慎重。

　　作者单位：100083北京医科大学微生物学系

　　参考文献

　　1　Simons JN, Leary TP, Dawson gJ, et al. Isolation of novel virus-like sequences associated with human hepatitis. Nat Med, 1995, 1:564-569.

　　2　Linnen J, Wages J, Zhang-Keck ZX, et al. Molecular cloning and disease association of hepatitis G virus: A transfusion-transmissible agent. Science,1996, 27:505-508.

　　3　Nishizawa T, Okamoto H, Konoshi K, et al. A novel DNA virus (TTV) associated with elevated transminase levels in posttrasnfusion hepatitis of unknown etiology. Biochm Biophys Res Comun, 1997, 241:92-97.

　　4　Mushahwar IK, Erker JC, Muerhoff AS, et al. Molecular and biophysical charaterization of TT virus: evidence for a new virus family infecting humans. proc Natl Acad Sci USA, 1999, 86: 3177-3182.

　　5　Okamoto H, Nishizawa T, Kato N, et al. Molecular cloning and characterization of a novel DNA virus (TTV) associated with posttransfusion hepatitis of unknown etiology. Hepatol Res, 1998, 10: 1-16.

　　6　马为民, 周伯平, 王火生, 等.一种新的可经输血传播的病毒分子流行病学研究.中华肝脏病杂志，1998, 6:167-169.

　　7　周伯平, 马为民, 王珊珊, 等. TTV在非甲～庚型肝炎患者中的检测.中华传染病杂志, 1998, 16:131-133.

　　8　Okamoto H, Akahane Y, Ukita M, et al. Fecal excretion of a nonenveloped dNA virus (TTV) associated with posttransfusion non-A-G hepatitis. J Med Virol,1998, 56: 128-132.

　　9　Ukita M, Okamoto H, Kato N, et al. Excretion into Bile of a novel unenveloped DNA virus (TT virus) associated with acute and chronic non-A-G hepatitis. J Infect Dis, 1999, 179: 1245-1248.

　　10　骆抗先, 章廉, 王珊珊，等.一种新型肠传性病毒性肝炎的临床临床流行病学的初步研究.中华肝脏病杂志，1998，6:161-163.

　　11　孟庆华, 周育森, 刘德恭, 等. TTV在肝炎患者中的检测及临床意义探讨.中华实验和临床病毒学杂志, 1998， 12：111-114.

(收稿：1999-02-10　　修回：1999-07-05)